Calculadora de ligação de DNA
Uma ligação une um pedaço de DNA, o inserto, a um vetor, o plasmídeo em que ele entra. Esta página calcula quanto inserto adicionar, em massa, para a razão molar que você escolher. Mude qualquer número e o resultado acompanha.
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Como funciona
A massa do inserto é igual à massa do vetor vezes o comprimento do inserto dividido pelo comprimento do vetor, e depois vezes a razão molar. Um inserto mais longo pesa mais para o mesmo número de moléculas, então a comparação de tamanhos importa.
Uma razão molar de 3 para 1 é um ponto de partida comum, mas muitos protocolos sugerem testar algumas razões. As instruções do seu kit de enzimas têm a palavra final para a sua reação.
Exemplo resolvido
Um vetor de 3.000 pb com 100 ng de DNA e um inserto de 1.000 pb, em razão molar de 3, precisa de 100 ng de inserto.
Perguntas
O que é a razão molar?
É quantas moléculas de inserto você adiciona para cada molécula de vetor. Uma razão de 3 para 1 significa três moléculas de inserto para cada molécula de vetor.
Por que a massa muda com o tamanho do inserto?
A massa depende do tamanho e da quantidade. Um inserto mais longo pesa mais, então o mesmo número de moléculas precisa de mais nanogramas.
Posso usar isto com qualquer kit?
Ele usa a conta padrão de inserto e vetor. Alguns kits recomendam quantidades próprias, então confira também o protocolo do seu kit.
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