Handeware
Wetenschap

Benodigde hoeveelheid insert (ng)

100

Ligatiecalculator

Bij een ligatie wordt een stuk DNA, de insert, aan een vector gekoppeld, het plasmide waar het in gaat. Deze pagina berekent hoeveel insert je toevoegt, op massa, voor de molaire verhouding die je kiest. Verander een getal en het antwoord past zich aan.

Zo werkt het

De massa van de insert is de massa van de vector maal de lengte van de insert, gedeeld door de lengte van de vector, en daarna maal de molaire verhouding. Een langere insert weegt meer bij hetzelfde aantal moleculen, dus de vergelijking van grootte telt mee.

Een molaire verhouding van 3 op 1 is een gangbaar startpunt, maar veel protocollen raden aan om een paar verhoudingen te testen. De instructies van je enzymkit bepalen het eindoordeel voor je reactie.

Rekenvoorbeeld

Een vector van 3.000 bp met 100 ng DNA en een insert van 1.000 bp, bij een molaire verhouding van 3, heeft 100 ng insert nodig.

Vragen

Wat is een molaire verhouding?

Het is hoeveel insertmoleculen je per vectormolecuul toevoegt. Een verhouding van 3 op 1 betekent drie insertmoleculen voor elk vectormolecuul.

Waarom verandert de massa met de grootte van de insert?

Massa hangt af van grootte en aantal. Een langere insert weegt meer, dus hetzelfde aantal moleculen heeft meer nanogram nodig.

Kan ik dit voor elke kit gebruiken?

Het gebruikt de standaard berekening voor insert en vector. Sommige kits adviseren eigen hoeveelheden, dus controleer ook het protocol van je kit.

Vergelijkbaar

Alle calculators: Wetenschap