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Ciencia

Cantidad de inserto necesaria (ng)

100

Calculadora de ligación

Una ligación une un fragmento de ADN, el inserto, a un vector, el plásmido en el que se introduce. Esta calculadora indica cuánto inserto añadir, en masa, para la relación molar que elijas. Cambia cualquier número y el resultado se actualiza.

Cómo funciona

La masa del inserto es igual a la masa del vector por la longitud del inserto, dividida entre la longitud del vector, y después por la relación molar. Un inserto más largo pesa más para el mismo número de moléculas, así que la comparación de tamaños importa.

Una relación molar de 3 a 1 es un punto de partida habitual, pero muchos protocolos sugieren probar varias relaciones. Las instrucciones de tu kit de enzimas tienen la última palabra para tu reacción.

Ejemplo resuelto

Un vector de 3000 pb con 100 ng de ADN y un inserto de 1000 pb, con una relación molar de 3, necesita 100 ng de inserto.

Preguntas

¿Qué es la relación molar?

Es cuántas moléculas de inserto añades por cada molécula de vector. Una relación de 3 a 1 significa tres moléculas de inserto por cada molécula de vector.

¿Por qué cambia la masa con el tamaño del inserto?

La masa depende del tamaño y del número. Un inserto más largo pesa más, así que el mismo número de moléculas necesita más nanogramos.

¿Puedo usar esto con cualquier kit?

Usa la fórmula estándar de inserto y vector. Algunos kits recomiendan sus propias cantidades, así que revisa también el protocolo de tu kit.

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